Zenix體積排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3 µm硅膠作為填料。3μm的粒徑結(jié)合大的孔體積使其成為目前國際上分辨率最高的體積排阻柱。賽分科技獨有的表面鍵合技術(shù)保證了填料表面鍵合的最大化，使其具有高的化學穩(wěn)定性及最小的非特異性吸附。Zenix系列體積排阻柱有100、150及300Å三種孔徑選擇，廣泛的應(yīng)用于生物分子及水溶性聚合物的分離與分析。
| 固定相 | Zenix SEC-80 | Zenix SEC-100 | Zenix SEC-150 | Zenix SEC-300 |
|---|---|---|---|---|
| 材料 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 | 表面鍵合親水薄膜的硅膠 |
| 顆粒大小 | 3 µm | 3 µm | 3 µm | 3 µm |
| 孔徑 (Å) | ~ 80 | ~ 100 | ~ 150 | ~ 300 |
| 蛋白分子量范圍 | 100 – 50,000 | 100 - 100,000 | 500 - 150,000 | 5,000 – 1,250,000 |
| 水溶性聚合物分子量范圍 | 500 – 5,000 | 500-10,000 | 500-25,000 | 1,000-100,000 |
| pH 穩(wěn)定性 | 2 –8.5，短時間可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5，短時可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5，短時可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5，短時可耐pH 8.5-9.5 |
| 反壓 (for a 7.8x300 mm) | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi |
| 最大耐受壓力 (psi) | ~ 4,500 | ~ 4,500 | ~ 4,500 | ~ 3,500 |
| 鹽濃度范圍 | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M |
| 最高使用溫度 (oC) | ~ 80 | ~ 80 | ~ 80 | ~ 80 |
| 流動相的兼容性 | 常規(guī)水相及有機相溶劑 | 常規(guī)水相及有機相溶劑 | 常規(guī)水相及有機相溶劑 | 常規(guī)水相及有機相溶劑 |
開發(fā)小粒徑填料的優(yōu)勢在于能實現(xiàn)更高的分離效率和分辨率。當粒徑從5 μm降至3 μm時，柱效幾乎為原先的兩倍。如圖1和表1所示：當填料粒徑從5 μm降至3 μm時，BSA二聚體、BSA、核糖核酸酶A的塔板數(shù)分別從2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。圖2和表2進一步表明3 μm Zenix柱在分離各種蛋白時能實現(xiàn)更高的分離效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm長的Zenix柱時能夠達到40,000的塔板數(shù)。
色譜柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流動相: 150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 7.8x300 mm為1.0 mL/min; 4.6x300 mm為0.35 mL/min
溫度: 室溫(~23℃)
檢測器: UV 214 nm
進樣量: 10 μL (4.6x300 mm為3 μL)
樣品: 1) 甲狀腺球蛋白(1.0 mg/mL), 670 kD; 2) BSA二聚體, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/mL), 66 kD; 4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶(2.5 μg/mL), 120 D
| 峰 | 蛋白 | Zenix 300 (4.6x300) | Zenix 300(7.8x300) | SRT 300(7.8x300) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 甲狀腺球蛋白 | 2180 | 1730 | 1120 |
| 2 | BSA二聚體 | 4390 | 4600 | 2720 |
| 3 | BSA | 10280 | 13090 | 6590 |
| 4 | 核糖核酸酶A | 16490 | 22000 | 11160 |
| 5 | 尿嘧啶 | 33640 | 38500 | 27860 |
色譜柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)
流動相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
反壓: Zenix SEC-300為1,375 psi, Zenix SEC-150為1,100psi
溫度: 室溫(~ 23℃)
檢測波長: 214 nm
進樣量: 10 μL
樣品: 1)甲狀腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚體, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D
| 峰 | 蛋白 | Zenix 150 | Zenix 300 |
|---|---|---|---|
| 1 | 甲狀腺球蛋白 | 18050 | 2460 |
| 2 | BSA二聚體 | 2420 | 5110 |
| 3 | BSA | 5620 | 13090 |
| 4 | 核糖核酸酶A | 17600 | 22000 |
| 5 | 尿嘧啶 | 42000 | 38500 |
載樣量是衡量體積排阻色譜柱性能的重要指標之一，下圖表明Zenix系列分析色譜柱在BSA上樣量高達500 µg的情況下，仍保持著完美的分析峰形。
色譜柱: Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
流動相: 150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
進樣量: 10 µL
檢測器: UV 214 nm
色譜柱: Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流動相: 150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
進樣量: 10 µL
檢測器: UV 214 nm
賽分科技獨有的表面修飾技術(shù)使得硅膠表面的鍵合密度達到最大化，從而阻止了能夠促進鍵合相脫落的溶劑分子向薄膜內(nèi)側(cè)的擴散，保證了其在pH 2-8.5范圍的穩(wěn)定使用。Zenix體積排阻柱適用于大多數(shù)水性及有機溶劑，包括：醋酸、磷酸、Tris緩沖鹽體系、甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等，同時可耐受高鹽溶液，如2.0 M的NaCl。
Zenix SEC固定相能與大多水相緩沖液兼容，如醋酸銨、磷酸鹽、Tris等。Zenix SEC固定相能夠承受高濃度鹽，如2.0 M。同時Zenix SEC柱在有機溶劑中，如甲醇、乙醇、四氫呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亞砜等，水和有機溶劑混合相中均能保持穩(wěn)定。
Zenix SEC固定相為親水性和中性，蛋白和其他生物分子與固定相之間的非特異性吸附可忽略?？梢种频鞍孜降焦枘z固定相表面的作用，從而能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白高的回收率，在分離后能夠保持蛋白的活性。酸性和堿性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能夠高于95%。
| 產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
|---|---|---|---|---|
| Zenix SEC-80 | 3 μm | 80 Å | 21.2x300 mm | 213080-21230 |
| Zenix SEC-80 | 3 μm | 80 Å | 7.8x300 mm | 213080-7830 |
| Zenix SEC-80 | 3 μm | 80 Å | 7.8x50 (保護柱) | 213080-7805 |
| Zenix SEC-80 | 3 μm | 80 Å | 4.6x300 mm | 213080-4630 |
| Zenix SEC-80 | 3 μm | 80 Å | 4.6x50 (保護柱) | 213080-4605 |
| 產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
|---|---|---|---|---|
| Zenix SEC-100 | 3 μm | 100 Å | 21.2x300 mm | 213100-21230 |
| Zenix SEC-100 | 3 μm | 100 Å | 7.8x300 mm | 213100-7830 |
| Zenix SEC-100 | 3 μm | 100 Å | 7.8x50 (保護柱) | 213100-7805 |
| Zenix SEC-100 | 3 μm | 100 Å | 4.6x300 mm | 213100-4630 |
| Zenix SEC-100 | 3 μm | 100 Å | 4.6x50 (保護柱) | 213100-4605 |
| 產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
|---|---|---|---|---|
| Zenix SEC-150 | 3 μm | 150 Å | 21.2x300 mm | 213150-21230 |
| Zenix SEC-150 | 3 μm | 150 Å | 7.8x300 mm | 213150-7830 |
| Zenix SEC-150 | 3 μm | 150 Å | 7.8x50 (保護柱) | 213150-7805 |
| Zenix SEC-150 | 3 μm | 150 Å | 4.6x300 mm | 213150-4630 |
| Zenix SEC-150 | 3 μm | 150 Å | 4.6x50 (保護柱) | 213150-4605 |
| 產(chǎn)品名稱 | 粒度 | 孔徑 | 規(guī)格 | 訂貨號 |
|---|---|---|---|---|
| Zenix SEC-300 | 3 μm | 300 Å | 21.2x300 mm | 213300-21230 |
| Zenix SEC-300 | 3 μm | 300 Å | 7.8x300 mm | 213300-7830 |
| Zenix SEC-300 | 3 μm | 300 Å | 7.8x50 (保護柱) | 213300-7805 |
| Zenix SEC-300 | 3 μm | 300 Å | 4.6x300 mm | 213300-4630 |
| Zenix SEC-300 | 3 μm | 300 Å | 4.6x50 (保護柱) | 213300-4605 |
